Оборудование: микроскоп, камера Горяева, пипетка, капилляр от гемометра Сали, пробирка с резиновой крышкой.

Реагенты: жидкость Тюрка (100 мл 5%-го р-ра уксусной к-ты и 1 мл 1%-го р-ра генциан фиолетового или метиленового синего), спирт, иммерсионное масло.

Камера Горяева – толстое предметное стекло с четырьмя желобами в средней части, между которыми находятся три узкие площадки, средняя из которых ниже боковых на 0,1 мм и разделена пополам поперечным желобком. По обе стороны от этого желобка расположены сетки, нанесенные на стекло. Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов, из которых 25 расчерчены вертикальными и горизонтальными линиями на 16 малых квадратов. Подсчет лейкоцитов ведут в счетной камере Горяева под малым увеличением микроскопа в 100 неразграфленных больших квадратах. Большой квадрат равен 16 малым, что соответствует 100 х 16 = 1600 малым квадратам. Единицей отсчета является маленький квадрат. Его сторона равна 1/20 мм, площадь 1/20*1/20=1/400 мм 2 . Объем крови, помещающейся над маленьким квадратом, равен 1/400 мм 2 *1/10 мм=1/4000 мм 3 (1/10 мм – высота слоя крови). из 225 больших квадратов

Ход работы. Покровное стекло притереть к камере Горяева до появления радужных колец.

Установить увеличение микроскопа в 280 раз (окуляр на 7, объектив на 40). Поставить камеру на предметный столик микроскопа, найти сетки, рассмотреть.

Пипеткой взять 0,4 мл жидкости Тюрка (5%-ый раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим) и влить в пробирку.

Набрать кровь в капилляр от гемометра Сали до отметки (0,02 мл); кончик капилляра вытереть ватой; опустить капилляр в пробирку с жидкостью Тюрка; выдуть кровь в пробирку; промыть капилляр, дважды выдувая этот раствор разбавителя. Пробирку закрыть резиновой пробкой, перемешать содержимое. Набрать содержимое пробирки в капилляр. Каплю из капилляра выпустить на среднюю пластинку под притертое покровное стекло к камере Горяева (пузырьки воздуха не должны попасть под покровное стекло). Оставить на 1 мин., чтобы осели клетки крови.

Подсчитать количество лейкоцитов в 100 больших квадратах (или 1600 малых квадратах). Учитывают клетки, находящиеся внутри каждого малого квадрата, на левых и верхних сторонах каждого квадратика. Не считают на нижних и правых сторонах квадрата, т.к. их число учитывается при подсчете лейкоцитов следующего квадрата.

Х=(А*4000*20)/1600, где

А – количество лейкоцитов в 100 больших квадратах,

4000 – коэффициент для приведения объема к 1 мм 3 (1/4000 мм 3 – объем одного маленького квадрата),

20 – коэффициент разведения крови объемом 0,02 мл,

1600 – количество маленьких квадратов.

Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл крови достаточно полученное при подсчете число разделить пополам и приписать 2 нуля (или подсчитанное число клеток крови разделить на 50), ошибка метода составляет ± 7%.

Например, подсчитано 160 лейкоцитов, тогда в абсолютных единицах получаем 8 000 клеток в 1 мкл крови. Для пересчета количества клеток в 1 л (система единиц СИ) необходимо результат умножить на 10 6 , т.е. 8 000*10 6 = 9*10 9 /л.

Оформление работы. Записать или зарисовать последовательность счета клеток в камере Горяева. Подсчитать количество клеток, записать.

Работа 5. Приготовление мазков крови , окрашивание по Романовскому-Гимзе

Оборудование: обезжиренные предметные и шлифовальные стекла, вата, пинцет, пипетка на 10 мл, глазные пипетки, ванночки размером с предметное стекло, карандаш.

Реагенты: кровь рыбы, 70 % этиловый спирт,

В основе методики лежит способность смеси основных (азур II) и кислых красителей (водорастворимый желтый эозин) окрашивать элементы клеток крови в разные цвета и оттенки. Окрашиватся ацидофильные образования в различные оттенки красного цвета, базофильные - в цвета от пурпурного до синего.

Ход работы. Обезжирить предметные стекла

Предметное стекло взять в левую руку между большим и указательным пальцами за короткие грани.

Каплю крови (величиной с зерном пшена) нанести на правый конец стекла (предметным стеклом, углом шлифовального стекла, пипеткой). Капля должна быть такого размера, чтобы конец мазка, приготовленного из нее, не доходил на 1 см до края стекла.

Шлифовальное стекло ставят под углом 45º к основному стеклу у правого края предметного стекла, надвигают на каплю крови так, чтобы у нижнего ребра шлифовального стекла равномерно распределилась капля крови. Распределяют справа налево каплю крови по предметному стеклу равномерно, быстро. Мазок должен быть тонким, ровным, желтоватым, просвечивающимся и отливать должен цветами радуги при просмотре на свет.

А – неравномерный мазок на плохо обезжиренном стекле; Б – короткий мазок; В – длинный и неравномерный мазок; Г – толстый в начале мазок; Д – правильный мазок.

Рисунок 2. Качество приготовленного мазка.

Высушить мазок быстро (под лампой, в термостате, высоко над спиртовкой).

Промаркировать простым карандашом.

Фиксировать в закрытой кювете в этиловом спирте 5 мин., высушить на воздухе.

На дно ч.Петри налить готовую краску Романовского, препарат уложить мазком вниз в краску, закрыть крышкой от ч.Петри (закрытая чашка Петри с увлажнённым фильтром на дне). Мазки окрашивать 20 - 25 минут во влажной камере в термостате при 37 °C.

После окрашивания мазки промыть в проточной воде, сушить на воздухе и исследовать при масляной иммерсии.

Оформление работы. Записать последовательность методики окрашивания.

5.

Необходимо для работы:

Проведение работы:

Цель работы:

Необходимо для работы:

Проведение работы:

не взбалтывать

· отсутствует гемолиз;

· частичный гемолиз;

· полный гемолиз.

Определение полей зрения.

Определение остроты зрения.

16. Дыхательные объемы и емкости. Методика определения ЖЕЛ. Спирография и спирометрия.

Применение миографии

· В психофизиологии для изучения возрастных закономерностей.

· В медицине для диагностики поражений периферической и центральной нервной системы.

· В физиологии труда и спорта.

· При изучении двигательной функции животных и человека.

· В исследованиях высшей нервной деятельности.

· В инженерной психологии (например, при исследовании утомления, выработки двигательного навыка).

· Для оценки при восстановлении нарушенной двигательной функции в ортопедии и протезировании.

Таблица 36

Затраты на основной обмен здоровых людей в зависимости от возраста и пола

Разница между показателями должного основного обмена, рассчитанными разными методами, обычно не превышает 10 %.

Термометрия.

Температура тела - важный показатель состояния здоровья человека. Нормальной температурой тела для взрослых в состоянии бодрствования и физиологического покоя (при измерении в подмышечной впадине) считается температура от 36°С до 36,9°С. Однако следует учитывать, что во время сна с 3 до 5 ч утра температура тела может достигать минимальных значений - 35,1–36,0°С. Таким образом, норма температуры тела при измерении в подмышечной впадине составляет 36±0,9°С (35,1 - 36,9°С). Температура 37°С и выше рассматривается как повышенная (гипертермия ), а 35°С и ниже – как пониженная (гипотермия ). При измерении в глубоких областях тела (прямой кишке, пищеводе) ее нормальные значения на 0,5°С выше, чем в подмышечной ямке.

Цель работы - определение минимального времени, необходимого для точного измерения аксиллярной температуры ртутными или электронными медицинскими термометрами в подмышечной впадине.

Материалы и оборудование: максимальный ртутный термометр, секундомер, 70 % спирт, вата.

Ход работы. Кожа подмышечной ямки должна быть сухой, так как при влажной коже термометр будет показывать более низкие значения температур из-за испарения влаги с поверхности ртутного резервуара. Обследуемый должен удерживать термометр в течение всего времени измерения, плотно прижав плечо к туловищу. Во время измерения температуры человек должен находиться в состоянии бодрствования и полного покоя.

Осмотрите медицинский термометр, убедитесь в его целости и протрите спиртом. Встряхните термометр до температуры 35°С. Поместите термометр в подмышечную впадину. Запишите показания термометра через 3, 5, 8, 10, 15 мин. Затем проведите термометрию с помощью электронного термометра, записывая показания шкалы прибора через 30 с, 1, 2, 3, 5, 8, 10, 15 мин. При выполнении работы необходимо следить, чтобы головка ртутного и кончик датчика электрического термометров удерживались по среднеаксиллярной линии.

По результатам опытов постройте графики показаний ртутного и электронного термометров в зависимости от времени измерения температуры.

Вывод: у испытуемого температура тела, измеренная в подмышечной впадине _____, длительность ее измерения ртутным должна быть не менее ___ мин.

21. Методика образования условных рефлексов.

Для образования условного рефлекса требуются определенные условия. Условным раздражителем, или сигналом, может быть любое изменение, возникшее во внешней среде или внутри организма. На каждый условный раздражитель (зажигание лампочки, музыкальные звуки, шумы, давление на поверхность кожи, прикосновение, чесание, укол, запах и т.п.) может быть выработан условный рефлекс.

Для образования условного рефлекса на условный (безразличный) раздражитель надо, чтобы этот условный сигнал предшествовал безусловному и в течение некоторого времени действия последнего сопровождал его. Например, звонок (условный сигнал) должен начать звенеть на 5–30 с раньше, чем собака получит корм (безусловный стимул), и некоторое время сопровождать еду. Для того, чтобы выработался условный рефлекс, надо несколько раз повторять такое сочетание.

Если сочетать условный раздражитель с пищевым подкреплением, то вскоре на этот, ранее безразличный раздражитель, образуется условный рефлекс. Один и тот же сигнал может стать раздражителем при выработке разных условных рефлексов. В одном случае звонок может вызвать слюноотделение, а в другом – оборонительный рефлекс и т.д. Это объясняется тем, что характер условного рефлекса определяется подкрепляющим безусловным рефлексом, т.е. условные рефлексы образуются на основе безусловных.

И.П. Павлов разработал методику образования условных рефлексов. Собаку помещают в специальную камеру, полностью изолированную от окружающего мира (никакие раздражители из внешней среды не должны проникать в камеру). Вне камеры находится и сам экспериментатор. При помощи специальной аппаратуры создаются разнообразные раздражители, выдается пищевое подкрепление, регистрируется слюноотделение и т.д. Вначале И.П. Павлов построил полностью изолированную камеру, однако позже выяснилось, что такая абсолютная изоляция не обязательна.

Таким образом, для образования условных рефлексов необходимы следующие специальные условия.

1. Наличие двух раздражителей: индифферентного (безразличного), который хотят сделать условным, и безусловного, вызывающего какую-либо деятельность организма, например отделение слюны, отдергивание лапы и т.п.

2. Индифферентный раздражитель (свет, звук и т.п.) должен предшествовать безусловному и некоторое время сопровождать действие последнего.

3. Безусловный раздражитель должен быть сильнее условного: для сытой собаки с низкой возбудимостью пищевого центра звонок не станет условным пищевым раздражителем.

4. Отсутствие отвлекающих посторонних раздражителей.

5. Активное состояние коры. Это верно и для человека. Если лекция не интересна и развивается полудремотное состояние, то материал не запоминается. Живая эмоциональная лекция с интересными примерами запоминается хорошо.

Электроэнцефалограмма (ЭЭГ) как метод регистрации электрических явлений в коре больших полушарий. Классификация ритмов ЭЭГ.

Электроэнцефалография (ЭЭГ) представляет собой метод регистрации биоэлектрической активности головного мозга, производимой через неповрежденные покровы головы.

Электрокортикография (ЭКоГ) - регистрация ведется с наложением электродов непосредственно на поверхность мозга. Введение электродов в глубокие отделы мозга позволяет провести электросубкортикографию (ЭСКоГ).

Краткая характеристика ЭЭГ здорового человека . В большинстве случаев у здорового бодрствующего человека, находящегося в положении лежа с закрытыми глазами или в темноте, регистрируются относительно регулярные, близкие к синусоидальным колебания биопотенциалов мозга, которые являются результатом множества электрических процессов в различных образованиях его, слагающихся в сложную волнообразную кривую, к которой условно применяют понятие о частоте, амплитуде, фазовых состояниях.

Особенно высокие и устойчивые кривые регистрируются в теменно-затылочной области, одиночные или групповые - в других отделах мозга. Эти кривые Н. Berger (1929) назвал альфа-ритмом; их напряжение при записи через электроды, расположенные на коже, колеблется в пределах 50-100 мкВ (в среднем 40 - 50 мкВ), продолжительность 60-140 мс и частота 8-13 колебаний в секунду. Редко они сохраняют устойчивость, амплитуда волн то убывает, го увеличивается, давая рисунок «веретен», «вздутий», «биений». Альфа-ритм преобладает на ЭЭГ здоровых взрослых людей в 70% случаев, у остальных выражен слабо или отсутствует (до 10% случаев). В передних отделах мозга, а также при подавлении альфа-активности внешними раздражениями выявляются бета-волны. Частота их в среднем равна 25 колебаниям в секунду и изменяется от 15 до 30 колебаний в секунду; волны большей частоты называются гамма-волнами.

Амплитуда бета-волн в 3-4 раза ниже, чем альфа-волн, и в некоторых записях эти колебания почти не различаются. Ткани, покрывающие мозг, оказывают большое электросопротивление (5*103-15*103 Ом) и снижают биопотенциалы в 5-10 раз, причем амплитуда быстрых колебаний уменьшается быстрее по сравнению с медленными волнами.

Основы классификации ритмов электроэнцефалограммы (ЭЭГ):

Традиционная ЭЭГ (диапазон частот 0,5-100 Гц):

Гамма-ритм (частота более 40 Гц, амплитуда менее 15 мкВ);

Бета-ритм (частота 14-40 Гц, амплитуда менее 25 мкВ);

Альфа-ритм (частота 8-13 Гц, амплитуда 10-150 мкВ);

Тета-ритм (частота 4-7 Гц, амплитуда 75-150 мкВ);

Дельта-ритм (частота 0,5-3 Гц, амплитуда свыше 100 мкВ).

Сверхмедленная биоэлектрическая активность

(диапазон частот менее 0,5Гц):

Секундные или дзета-волны (частота 0,1-0,5 Гц, период от 2 до 10 секунд, амплитуда менее десятки и сотни мкВ);

Многосекундные или тау-волны (частота 0,0167-0,1 Гц, период от 10 до 60 секунд, амплитуда сотни мкВ)

Минутные и многоминутные или эпсилон-волны (частота менее 0,0167 Гц, период от 1 минуты и более, амплитуда сотни мкВ, единицы и десятки мВ)

Относительно постоянный потенциал милливольтового диапазона или омега-потенциал (устойчив в течение часов, амплитуда ± 110 мВ)

Рецепторы, их классификация: по локализации (мембранные, ядерные), механизму развития процессов (ионо- и метаьотропные), по скорости приема сигнала (быстрые, медленные), по роду вопринимающих веществ.

Рецепторы представляют собой конечные специализированные образования, предназначенные для трансформации энергии различных видов раздражителей в специфическую активность нервной системы.

Классификация:

по локализации

· мембранные

· ядерные

по механизму развития процессов

· ионотропные (представляют собой мембранные каналы, открываемые или закрываемые при связывании с лигандом. Возникающие при этом ионные токи вызывают изменения трансмембранной разности потенциалов и, вследствие этого, возбудимости клетки, а также меняют внутриклеточные концентрации ионов, что может вторично приводитъ к активации систем внутриклеточных посредников. Одним из наиболее полно изученных ионотропных рецепторов является н-холинорецептор.)

· метаботропные (связаны с системами внутриклеточных посредников. Изменения их конформации при связывании с лигандом приводит к запуску каскада биохимических реакций, и, в конечном счете, изменению функционального состояния клетки.)

по скорости приема сигнала

· быстрые

· медленные

по роду вопринимающих веществ

· Хеморецепторы - воспринимают воздействие растворенных или летучих химических веществ.

· Осморецепторы - воспринимают изменения осмотической концентрации жидкости (как правило, внутренней среды).

· Механорецепторы - воспринимают механические стимулы (прикосновение, давление, растяжение, колебания воды или воздуха и т. п.)

· Фоторецепторы - воспринимают видимый и ультрафиолетовый свет

· Терморецепторы - воспринимают понижение (холодовые) или повышение (тепловые) температуры

· Барорецепторы – воспринимают изменение давления

3. Ионотропные рецепторы, метаботпропные рецепторы и их разновидности. Системы вторичных посредников действия метаботропных рецепторов (цАМФ, цГМФ, инозитол-3-фосфат, диацилглицерол, ионы Са++).

На постсинаптической мембране выделяют два типа рецепторов - ионотропные и метаботропные.

Ионотропнный
В случае ионотропного рецептора чувствительная молекула содержит не только активный центр для связывания медиатора, но также ионный канал. Воздействие «первичного посредника» (медиатора) на рецептор приводит к быстрому открыванию канала и развитию постсинаптического потенциала.
Метаботропный
При присоединении медиатора, и возбуждении метаботропного рецептора изменяется внутриклеточный метаболизм, т.е. течение биохимических реакций

С внутренней стороны мембраны к такому рецептору присоединен целый ряд других белков, выполняющих ферментативные и частью передающие («посреднические») функции (рис.). Белки-посредники относятся к G-белкам. Под влиянием возбужденного рецептора G-белок воздействует на белок-фермент, обычно переводя его в «рабочее» состояние. В результате запускается химическая реакция: молекула-предшественник превращается в сигнальную молекулу - вторичный посредник.

Рис. Схема строения и функционирования метаботропного рецептора: 1 - медиатор; 2 - рецептор; 3 - ионный канал; 4 - вторичный посредник; 5 - фермент; 6 - G-белок; → - направление передачи сигнала

Вторичные посредники - это мелкие, способные к быстрому перемещению молекулы или ионы, передающие сигнал внутри клетки. Этим они отличаются от «первичных посредников» - медиаторов и гормонов, передающих информацию от клетки к клетке.

Наиболее известным вторичным посредником является цАМФ (циклическая аденозинмонофосфорная кислота), образуемая из АТФ с помощью фермента аденилатциклазы. Похожа на него цГМФ (гуанозинмонофосфорная кислота). Другими важнейшими вторичными посредниками являются инозитолтрифосфат и диацилглицерол, образуемые из компонентов клеточной мембраны под действием фермента фосфолипазы С. Чрезвычайно велика роль Ca 2+ , входящего в клетку снаружи через ионные каналы или высвобождающегося из особых мест хранения внутри клетки («депо» кальция). В последнее время много внимания уделяется вторичному посреднику NO (оксиду азота), который способен передавать сигнал не только внутри клетки, но и между клетками, легко преодолевая мембрану, в том числе от постсинаптического нейрона к пресинаптическому.

Заключительный шаг в проведении химического сигнала - воздействие вторичного посредника на хемочувствительный ионный канал. Это воздействие протекает либо непосредственно, либо через дополнительные промежуточные звенья (ферменты). В любом случае происходит открытие ионного канала и развитие ВПСП либо ТПСП. Продолжительность и амплитуда их первой фазы будет определяться количеством вторичного посредника, которое зависит от количества выделившегося медиатора и длительности его взаимодействия с рецептором.

Таким образом, механизм передачи нервного стимула, используемый метаботропными рецепторами, включает в себя несколько последовательных этапов. На каждом из них возможна регуляция (ослабление либо усиление) сигнала, что делает реакцию постсинаптической клетки более гибкой и адаптированной к текущим условиям. Вместе с тем это же приводит к замедлению процесса передачи информации

Система цАМФ

Фосфолипаза С

Методика подсчета лейкоцитов в крови.

4. Методика определения количества гемоглобина в крови.

5.
Определение цветного показателя крови. Абсолютное содержание гемоглобина в эритроцитах.

6. Методика определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ).

7. Методика определения групп крови.

Определения свертывания крови по Сухареву.

Необходимо для работы: испытуемый, чистый и сухой капилляр от прибора Панченкова, стерильный скарификатор и пинцет, спирт, йод, вата.

Проведение работы:

1. Проколоть палец, снять первую каплю крови сухой ваткой.

2. Погрузить конец капилляра в каплю крови, не прижимая отверстия к пальцу.

3. Слегка опустив наружный конец капилляра, набрать 20-30 мм крови и перевести этот столбик крови на середину.

4. Держа капилляр двумя пальцами, произвести плавное покачивание его в обе стороны с амплитудой 40-45 0 .

Свободное смещение столбика крови говорит о том, что свертывание еще не наступило. Замедленное движение крови при наклоне капилляра характеризует начало свертывания, при этом на внутренней стенке капилляра появляются небольшие сгустки.

Момент полной остановки движения столбика крови в капилляре соответствует наступлению окончательного свертывания крови. По предлагаемой методике скорость свертывания крови в норме: начало свертывания происходи через 30 с - 2 мин., полное свертывание - через 3-5 мин.

9. Методика определения осмотической резистентности эритроцитов.

Цель работы: ознакомиться со свойствами осмотической устойчивости эритроцитов и произвести количественную оценку их резистентности по отношению к гипотоническим растворам.

Необходимо для работы: восемь чистых и сухих пробирок, штатив, мерный цилиндр на 5-10 мл, 1%-ный раствор хлористого натрия, дистиллированная вода, стерильные скарификаторы и пинцет, спирт, йод, вата, стеклянные палочки, мерные пипетки.

Проведение работы:

1. В каждую из пробирок налить 1%-ный раствор хлористого натрия в убывающем количестве от 0,6 до 0,15 мл, затем в каждую пробирку добавить дистиллированной воды до 1 мл. Пробирки пронумеровать.

2. Во все пробирки добавить с помощью капилляра Сали по капле крови. Добавление крови лучше начинать с пробирки, в которую помещен раствор с наименьшей концентрацией, и идти в сторону увеличения. Осторожно перемешать содержимое, чтобы не образовались пузырьки воздуха.

3. Оставить пробирки в штативе на хорошо освещенном месте на 30-40 мин, после чего рассмотреть их содержимое (не взбалтывать !). Проанализировать результаты.

4. О границах (уровне) осмотической резистентности эритроцитов судить по степени гемолиза крови в различных гипотонических растворах.

6. Отметить пробирки, в которых:

· отсутствует гемолиз;

· частичный гемолиз;

· полный гемолиз.

7. В выводах дать определение верхней и нижней границ резистентности эритроцитов и сделать заключение о соответствии полученных результатов физиологической норме.

КАМЕРЫ СЧЁТНЫЕ - приборы для подсчета форменных элементов крови, мочи и цереброспинальной жидкости, а также микроорганизмов. Предложена К. с. франц. физиологом Малассе (L. Ch. Malassez) в 1874 г.

К. с. представляют собой толстое предметное стекло с углублением, на дне к-рого выгравирована счетная сетка; над углублением накладывают шлифованное покровное стекло. Постоянная высота К. с. обеспечивается плотным притиранием покровного и предметного стекол до образования радужных ньютоновых колец (полосы интерференции).

Структурными элементами всех типов сеток являются большие и малые квадраты. Сетки различных типов - Тома, Бюркера, Предтеченского, Тюрка, Нейбауэра, Горяева, Фукса - Розенталя и др.- отличаются различным группированием больших и малых квадратов.

Известные величины - высота камеры, площадь сетки и ее делений и разведение взятой для исследования крови - позволяют высчитать количество форменных элементов в определенном объеме (1 мкл) крови (или другой среды).

Различают открытые и закрытые К. с. В закрытой камере покровное стекло притирают после ее заполнения, и при этом в нее могут попасть пузырьки воздуха. Такие К. с. (Тома - Цейсса с сеткой Тома, Дунгера с особой сеткой) неудобны в работе и не используются.

Открытые камеры (рис. 1) заполняются после притирания покровного стекла. Они имеют две сетки на одном предметном стекле. Пластинки с выгравированными сетками отграничены желобками одна от другой, а также от остальной части предметного стекла. Наличие желобков дает возможность регулировать заполнение камер. Некоторые камеры снабжены металлическими зажимами, фиксирующими покровное стекло.

Открытые К. с. впервые описал С. П. Алферов в 1883 г., затем в 1905 г. Бюркер (К. Burker). Известны открытые счетные камеры Ключарева, Гауссера и Леви, Гельбера, Глауберманна. В СССР широко применяются счетные камеры Горяева и Фукса - Розенталя. Камера Горяева с сеткой Горяева (рис. 2) имеет объем 0,9 мкл, площадь сетки 9 мм 2 . Сетка состоит из 225 больших квадратов; из них 100 - пустые, 25 - разделены каждый на 16 малых квадратов, 100 - разделены полосами.

Счетная камера Фукса - Розенталя с сеткой Фукса - Розенталя (рис. 3) имеет объем 3,2 мкл, площадь сетки 16 мм 2 , она состоит из 256 больших квадратов (квадраты, разделенные полосами, не считают).

Методика работы

Перед работой предметное стекло К. с. и шлифованное покровное стекло моют под струей водопроводной воды и насухо вытирают. Затем плотно притирают покровное стекло к камере (до появления радужных ньютоновых колец, ибо только при этом условии объем К. с. постоянен).

Содержимое пробирки перед заполнением камеры несколько раз перемешивают, затем оплавленным концом стеклянной палочки отбирают из пробирки, наклоняя ее, каплю крови и наносят на предметное стекло у самого края покровного стекла. Если одной капли крови недостаточно для полного заполнения К. с., добавляют еще каплю. Если кровь взята в смеситель, то первые капли из капилляра смесителя выпускают, а К. с. заполняют каплей из ампулы смесителя. Остатки жидкости с предметного стекла удаляют марлевым тампоном. Подсчет начинают через 3 мин. после заполнения камеры (за это время происходит оседание форменных элементов крови) под микроскопом при малом увеличении (объектив X 8, окуляр X 10 или X 15) и затемненном поле зрения (с прикрытой диафрагмой или при несколько опущенном конденсоре). Счету подлежат клетки, лежащие внутри квадрата (рис. 4). Клетки, пересеченные сторонами квадратов, считают следующим образом: если более половины клетки находится внутри квадрата, то ее считают, если вне - ее не считают. Клетки, пересекаемые линиями точно посередине, считают на двух смежных, правой и верхней, линиях квадратов и не считают на двух других. При использовании соответствующих разводящих р-ров эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, эозинофилы, базофилы и ретикулоциты могут быть подсчитаны в камере Горяева.

Эритроциты считают в 80 малых квадратах, т. е. в 5 больших квадратах, расположенных по диагонали. Расчет проводится по формуле:

X = a*4000*200/80,

где а - количество эритроцитов, подсчитанное в 80 малых квадратах, 80 - количество сосчитанных малых квадратов, 200 - степень разведения крови, 4000 - множитель для получения содержания эритроцитов в 1 мкл крови (объем малого квадрата 1/4000 мкл). Практически количество эритроцитов, подсчитанное в 5 больших квадратах, умножают на 10 000.

Лейкоциты подсчитывают в 1600 малых квадратах (в 100 больших квадратах). Расчет проводится по формуле:

X = a * 4000 * 20 /1600,

где а - количество лейкоцитов, подсчитанное в 1600 малых квадратах, 1600 - количество сосчитанных малых квадратов, 20 - степень разведения крови, 4000 - множитель для получения содержания лейкоцитов в 1 мкл крови. Практически количество лейкоцитов, подсчитанное в 1600 малых квадратах, умножают на 50.

Тромбоциты подсчитывают в 400 малых квадратах (25 больших квадратах по диагонали сетки). Реактивами для разведения могут быть изотонический р-р хлорида натрия, различные р-ры, консервирующие тромбоциты и гемолизирующие эритроциты.

Считают тромбоциты под обычным микроскопом и с помощью фазово-контрастного устройства (см. Фазово-контрастная микроскопия) для более четкого выявления их. После разведения пробирку с кровью оставляют на 25-30 мин. для гемолиза эритроцитов. Затем содержимое пробирки повторно перемешивают и заполняют К. с., к-рую помещают на 5 мин. во влажную камеру (напр., чашки Петри с влажной ватой) для оседания тромбоцитов. Расчет проводят по формуле:

X = a*4000*200/400,

где а - количество тромбоцитов, подсчитанное в 400 малых квадратах, 200 - степень разведения крови, 400 - число сосчитанных малых квадратов, 4000 - множитель для получения содержания тромбоцитов в 1 мкл крови. Практически количество тромбоцитов, подсчитанное в 400 малых квадратах, умножают на 2000.

Количество базофилов и эозинофилов подсчитывают в камере Горяева в 1600 малых квадратах, как и лейкоциты. Практически подсчитанное количество базофилов и эозинофилов умножают на 50.

Ретикулоциты подсчитывают в камере Горяева в 80 малых квадратах, как эритроциты. Практически подсчитанное количество ретикулоцитов умножают на 10 000.

Определение общего количества клеток в цереброспинальной жидкости (см.) лучше производить в камере Фукса - Розенталя (из-за небольшого числа лейкоцитов в цереброспинальной жидкости). Подсчитывают по всей сетке (256 больших квадратов) под малым увеличением микроскопа (окуляр X 15, объектив х 8).

При очень большом количестве клеток допускается подсчет половины сетки (с последующим умножением результата на 2). Расчет проводят по формуле:

X = a*11/3,2*10,

где а - количество клеток, подсчитанное в 256 квадратах, 11/10- степень разведения, 3,2- объем камеры в мкл. Практически при подсчете в камере Фукса - Розенталя число лейкоцитов делят на 3.

В камере Горяева клетки цереброспинальной жидкости считают не менее 3 раз (также всю площадь), каждый раз заполняя камеру заново, затем берут среднее арифметическое. Расчет проводят по формуле:

X = a*11/0,9*10,

где а - среднее арифметическое количество клеток, подсчитанное по всей сетке, 11/10 - степень разведения, 0,9 - объем камеры в мкл. Практически число подсчитанных лейкоцитов умножают на 1,2.

Количественное определение форменных элементов в моче проводит в камерах Фукса - Розенталя, Горяева: подсчет эритроцитов и лейкоцитов при среднем увеличении микроскопа, подсчет цилиндров - при малом. Степень разведения мочи зависит от метода исследования (см. Моча).

Подсчет в К. с. не вполне точен. Ошибка метода составляет от 10 до 20% в зависимости от количества подсчитываемых элементов.

Уход и условия хранения

Следует предохранять камеры от загрязнения и попадания пыли на сетку. После работы камеру и покровное стекло моют под струей водопроводной воды и осторожно, но тщательно вытирают чистой салфеткой (можно марлевой). Затем завертывают в бумагу и убирают в коробку.

Библиография: Справочник по клиническим лабораторным методам исследования, под ред. Е. А. Кост, с. 22, М., 1975.

Д. Н. Ишмухаметов

Подсчет количества лейкоцитов крови может быть произведен в счетной камере Бюркера с сеткой Горяева или в электронно-автоматических анализаторах («Целлоскоп», «Культер», «Техникан»).

Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева

Принцип метода: аналогичен таковому подсчету эритроцитов, суть его состоит в точном отмеривании кро­ви и ее разведении в определенном объеме жидкости с по­следующим подсчетом клеточных элементов в счетной ка­мере и пересчете полученного результата на 1 крови.

Оборудование и реактивы:

смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;

3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;

счетная камера;

микроскоп.

Смеситель для лейкоцитов отличается от такового для эритроцитов тем, что имеет более широкий просвет капил­ляра и меньший по величине резервуар. На смеситель нане­сены три метки: 0,5, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10 либо в 20 раз (чаще разводят в 20 раз).

Ход исследования: при взятии крови для подсчета лей­коцитов с кожи предварительно удаляют ватным тампо­ном остатки крови и, слегка сдавливая палец, выпускают свежую каплю крови. При работе со смесителями кровь набирают до метки 0,5, затем разводят 3 % раствором ук­сусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в те­чение 3 мин, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета лейкоцитов наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кисло ты и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипет­кой от гемометра Сали. Тщательно встряхивают пробир­ки, затем в жидкость опускают пипетку и, набрав содер­жимое, заполняют счетную камеру. Так как лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, то для получения до­стоверного и точного результата подсчет производят в 100 больших (неразграфленных) квадратах. Обычно в одном большом квадрате находится 1-2 лейкоцита. Число лей­коцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расче­ту числа эритроцитов по формуле

X = (А х 4000 х В)/Б,

где X - количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А - количе­ство лейкоцитов, сосчитанных в 1600 малых квадратах; Б - количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 - величина, умножая на которую, мы получаем ко­личество клеток в 1 мкл.

Интерпретация полученных данных. Нормальное количество лейкоцитов: 4.0 – 9.0 х 10 9 /л. Уменьшение их числа в кро­ви называется лейкопенией, увеличение - лейкоцитозом.

Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и от­носительным (перераспределительным).

Абсолютный лейкоцитоз – наблюдается при острых воспалительных процессах, некрозе тканей, острых бактериальных инфекциях (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза, туляремии и др.), аллергических состояниях, злокачественных опухолях (с деструкцией тканей), закрытых травмах черепа и кровоизлияниях в мозг, диабетической и уремической коме, шоке, острой кровопотере, как первичная реакция – при лучевой болезни. Значительное повышение количество лейкоцитов встречается при лейкозах.

От­носительный (перераспределительный) является следствием поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для нее депо. Это происходит после приема пищи (пищевой лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз), интенсивной мышечной работы (миогенный лейкоцитоз) и т.д.

Лейкопения. Лейкопения рассматривается как показатель угнете­ния функциональной способности костного мозга в ре­зультате воздействия токсических веществ (мышьяк, бен­зол и т.п.), некоторых медикаментов (сульфаниламиды, левомицетин, бутадион, иммуран, циклофосфан и т.п.), вирусов (гриппа, вирусного гепатита, кори и т.п.), микро­бов (брюшного тифа, бруцеллеза и т.п.), ионизирующей радиации, рентгеновского излучения и гиперспленизма (увеличение функции селезенки).

Лейкоцитоз и лейкопения редко характеризуются пропорциональным увеличением (снижением) суммарного числа лейкоцитов всех видов (например лейкоцитоз при сгущении крови); в большинстве случаев имеется увеличение (уменьшение) числа какого-либо одного типа клеток, поэтому применяют термины «нейтрофилез», «нейтропения», «лимфоцитоз», «лимфопения», «эозинофилия», «эозинопения», «моноцитоз», «моноцитопения», «базофилия».

При клинической оценке изменения количества лейкоцитов большое значение придается процентному соотношению отдельных форм лейкоцитов, то есть лейкоцитарной формуле.

Лейкоцитарная формула крови здорового человека:

Относительное количество Абсолютное количество

Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 10 9 /л

Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 10 9 /л

Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют

Метамиелоциты……0% отсутствуют

Палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 10 9 /л

Сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 10 9 /л

Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 10 9 /л

Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 10 9 /л

Подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках периферической крови. Для правильной интерпрепатации результатов исследования лейкоцитарной формулы рекомендуется производить подсчет в абсолютных количествах, а не в относительных. Наиболее распространены методы окраски мазков по Романовскому-Гимзе, по Паппенгейму. Под иммерсией считают не менее 200 клеток, а затем выводят процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Анализ лейкограммы с учетом других показателей крови и клинической картины является ценным методом обследования, помогает в постановке диагноза и определении прогноза заболевания.

Основные причины нейтрофилеза.

Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.

Воспаление или некроз ткани.

Миелопролиферативные заболевания.

Интоксикация.

Лекарственные воздействия (кортикостероиды).

Острые кровотечения.

Основные причины нейтропении.

Инфекции – бактериальные (брюшной тиф, бруцеллез, туляремия, паратифы) и вирусные (инфекционный гепатит, корь, грипп, краснуха и другие).

Миелотоксические влияния и супрессия гранулоцитопоэза (ионизирующая радиация; химические агенты – бензол, анилин, ДДТ; лекарственные воздействия – цитостатики и иммунодепрессанты; витамин-В 12 -фолиеводефицитная анемия, острый алейкемический лейкоз, апластическая анемия).

Воздействие антител (иммунные формы) – гиперчувтвительность к медикаментам, аутоиммунные заболевания (СКВ, ревматоидный артрит, хронический лимфолейкоз), изоиммунные проявления (гемолитическая болезнь новорожденных).

Перераспределение и депонирование в органах – шоковые состояния, заболевания со спленомегалией и гиперспленизмом.

Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).

Основные причины эозинофилии.

Аллергические заболевания.

Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.

Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).

Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.

В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).

Причины эозинопении (анэозинофилии).

Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.

Брюшной тиф.

Основные причины базофилии:

Хронический миелолейкоз и эритремия.

Основные причины моноцитоза.

Подострые и хронические бактериальные инфекции.

Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.

Другие состояния – СКВ, саркоидоз, ревматоидный артрит, инфекционный моноцитоз; в период выздоровления от инфекций, при выходе из агранулоцитоза, после спленэктомии.

Снижение числа моноцитов имеет значение главным образом при оценке лимфоцитарно-моноцитарного соотношения при легочном туберкулезе.

Основные причины лимфоцитоза.

Инфекции – острые вирусные (инфекционный мононуклеоз, корь, краснуха, ветряная оспа), хронические бактериальные (туберкулез, сифилис, бруцеллез), протозойные (токсоплазмоз).

Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).

Другие заболевания - гипертиреоз, аддисонова болезнь, витамин-В 12 -фолиево-дефицитная анемия, гипо- и апластические анемии.

Лимфоцитопения наблюдается при СКВ, лимфогранулематозе, распространенном туберкулезе лимфоузлов, в терминальной стадии почечной недостаточности, острой лучевой болезни, иммунодефицитных состояниях, приеме глюкокортикоидов.

Увеличение или уменьшение числа отдельных видов лейкоцитов в крови может быть относительным или абсолютным. Если изменяется только процентное содержание того или иного вида лейкоцитов, то имеет место относительная нейтрофилия, относительная эозинопения и т.д. Увеличение или уменьшение абсолютного содержания какого-либо вида лейкоцитов, то есть количества данных клеток в единице объема крови, называют абсолютной нейтрофилией, абсолютной эозинопенией и т.д.

Сдвиг формулы влево (увеличение количества молодых форм нейтрофилов) – признак воспаления или некротического процесса в организме.

Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В 12 -фолиеводефицитной анемии.

Отсутствие или значительное снижение числа всех видов зернистых лейкоцитов – гранулоцитов (нейтрофилов, эозинофилов, базофилов) обозначают термином агранулоцитоз. В зависимости от механизма возникновения различают миелотоксический (воздействие ионизирующего излучения, прием цитостатиков) и иммунный (гаптеновый и аутоиммунный агранулоцитоз).

Устройство камеры и сетки Горяева . Камера Горяева представляет собой толстое предметное стекло, прорезанное четырьмя поперечными бороздами. Борозды делят стекло на пластинки - две боковые и среднюю. Средняя пластинка на 0,1 мм ниже боковых. Она разделена поперечной бороздкой на 2 равные части. На каждой половине средней пластинки нанесена сетка Горяева. Принадлежностью" камеры служит шлифованное покровное стекло. Его следует наложить так, чтобы оно покрыло обе боковые и среднюю пластинки. Нажимая большими пальцами на края стекла, его притирают к боковым пластинкам до появления радужных колец (кольца Ньютона).

Так как боковые пластинки выше средней, между нею и покровным стеклом остается щель. Это и есть камера, в которую заливают разведенную кровь. Глубина камеры 0,1 мм.

Нанесенная на дно камеры сетка Горяева квадратная. Сторона ее - 3 мм, площадь--9 мм » . Сетка разграфлена на 225 больших квадратов-15 по горизонтали и 15 по вертикали. Часть больших квадратов (через два на третий) разделена на 16 малых квадратов. Сторона малого квадра­та равна 1/20 мм.

Техника подсчета . Правильное заполнение счетной камеры разведенной кровью обеспечивает точность под­счета форменных элементов. Перед заполнением камеры содержимое пробирки перемешивают, вращая ее между ладонями в течение 2 мин. Разведенную кровь наносят на среднюю пластинку камеры пастеровской пипеткой с баллоном или стеклянной палочкой, помещая ее около края покровного стекла. По закону капиллярности жид­кость затекает под стекло, заполняя камеру.

После заполнения камеру нужно положить на стол на 2-3 мин, пока движение жидкости в ней не прекратится, и клетки не расположатся неподвижно на фоне квадратов сетки. При заполнении камеры жидкость не должна стекать в борозды. Недопустимо попадание в камеру пузырьков воздуха.

Подсчет производят под малым" увеличением микро­скопа (об.8, ок.10 или 15), конденсор должен быть опущен, а диафрагма закрыта.

Возможные ошибки при подсчете:

Правила :

К данному квадрату принадле­жат клетки, находящиеся большей своей половиной внут­ри него;

Клетки, разделенные пограничной линией попо­лам, считают только на верхней и левой границе квадрата;

Клетки же, лежащие большей своей половиной вне данно­го квадрата не считают вовсе.

Принцип . Подсчет эритроци­тов под микроскопом в определенном количе­стве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови, исходя из объема квадратов и разведе­ния крови.

Реактивы . 0,9 % раствор хлорида натрия

Специальное оборудование . 1. Счетная камера Горяева. 2. Микроскоп.

Ход исследования . Разводят иссле­дуемую кровь в 200 раз. Для этого в сухую про­бирку отмеривают 4 мл реактива 1 или 2. Пипет­кой набирают 0,02 мл крови. Кончик пипетки вы­тирают фильтровальной бумагой или марлей, и кровь выдувают на дно пробирки; пипетку тща­тельно промывают в верхнем слое жидкости, повторно набирая ее и выдувая в пробирку, содержимое пробирки перемешивают и остав­ляют стоять до момента счета (рекомендуется считать эритроциты в ближайшие 2-3 ч после взятия крови, а при гемолитических и. В 12-дефи­цитных анемиях - сразу после взятия, так как эритроциты могут разрушиться). Недопустимо оставлять взятую кровь с несосчитанными эри­троцитами на следующий день, так как эритро­циты частично разрушаются.

Подготавливают счетную камеру : протирают насухо камеру с сеткой и покровное стекло, за­тем покровное стекло притирают к камере, слегка надавливая на стекло таким образом, чтобы по краям его появились радужные полосы (это сви­детельствует о требуемой высоте камеры - 0,1 мм).

Заполняют счетную камеру разведенной кровью : предварительно несколько раз тщатель­но встряхивают содержимое пробирки, затем пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой отбирают каплю разведенной крови и подносят ее к краю покровного стекла, следя за тем, чтобы она равномерно без пузырьков воздуха запол­нила всю поверхность камеры с сеткой, не зате­кая в бороздки. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении 1 мин (ДЛЯ ОСЕДАНИЯ эритроцитов).

Для подсчета эритроцитов - микроскоп (объектив на 8х, окуляр на 10Х), находят верхний левый край сетки. Счет производят в 5 больших квадратах, разделенных на 16 малых, т. е. в 80 малых квадратах.

Расчет количества эритроцитов:

производится по следующей формуле:

Х= а ■ 4000 ■ в

где X - количество форменных элементов в 1 мкл крови;

а - количество формен­ных элементов, сосчитанных в 80 малых квадратов;

б- количество сосчитанных малых квадратов;

в - степень разведения крови; 1\4000 мкл - объем малого квадрата; умножая на 4000, приводим к объему 1 мкл крови.

Сокращенная формула: Х= а х10000

Нормативные показатели:

У мужчин: 4,0-5,0 х 10 12

У женщин: 3,7-4,7 х 10 12

Клинико-диагностическое значение: Снижение числа эритроцитов в крови является одним из ос­новных лабораторных критериев анемии. Однако степень эритроцитопении широко варьирует при разных формах малокровия. Так, при наиболее распространенном заболевании - железодефицитной анемии на почве хронических кровопотерь - количество эритроцитов может быть нор­мальным или нерезко сниженным (3 10 6 - 3,6-10 6 в 1 мкл, или 3-10" 2 /л - 3,6-10 |2 /л). При острой кровопотере, В|2 -дефицитной анемии (в стадии рецидива), гипопластической анемии, гемолитических анемиях (в период криза) число эритроцитов в крови может значительно сни­зиться и достигнуть I -10 6 в 1 мкл, или 1 10 |2 /л и менее.

Повышение количества эритроцитов в кро­ви - эритроцитоз - может быть обусловлен многими причинами. Значительный эритроцитоз (6,5-10 6 -8,5-10 е в 1 мкл, или 6,5-10 |2 /л - 8,5-10 |2 /л крови) является одним из важных лабораторных симптомов эритремии. Другие гемобластозы миелопролиферативной природы (сублейкемический миелоз или миелофиброз и хронический миелолейкоз) реже сопровождают­ся эритроцитозом и только в начальной стадии заболевания.

Вторичный (симптоматический) эритроцитоз может сопутствовать широкому кругу различ­ных заболеваний и бывает абсолютным (связан­ный с усилением нормального эритропоэза) и от­носительным (гемоконцентрационный). Абсо­лютные эритроцитозы сопутствуют хроническим обструктивным заболеваниям легких, врожден­ным порокам сердца, первичной легочной гипертензии, синдрому Пиквика, наследственным гемоглобинопатиям, гипернефроидному раку, гемангиобластоме мозжечка, гепатоме, гормо­нально-активным опухолям, заболеваниям, со­провождающимся стенозом почечных артерий, заболеваниям ЦНС и др. Вторичные относитель­ные эритроцитозы связаны с нарушением гемо-концентрации и характеризуются нормальным объемом циркулирующих эритроцитов при сни­жении массы циркулирующей крови и массы циркулирующей плазме.

Патологические формы эритроцитов

Повышение числа эритроцитов - полицитемия, мо­жет быть истинной (опухолево-пролиферативный процесс) и симптоматической (реактивное раздражение эритропоэза, сгущение крови, нарушение нервной регуляции и пе­рераспределения). Понижение числа эритроцитов - ане­мия (постгеморрагическая, гемолитическая, вследствие нарушения кроветворения).

Качественные изменения эритроцитов . Анизоцитоз - изменение величины эритроцитов (эритроциты меньших размеров называются микроцитами; больших - макроцитами, эритроциты диаметром 12 мкм и более называются мегалоцитами). Пойкилоцитоз - изменение формы эритроцитов (грушевидные, серповидные - дрепаноциты, каплевидные, мишеневидные, с вытянутыми концами, шизоциты - обломки разрушенных эритроци­тов, акантоциты - эритроциты зубчатой формы, стоматоциты - эритроциты с просветлением в центре в виде узкой линейной полоски как форма рта, эхиноциты - эритроциты с множественными выростами, анулоциты - эритроциты в виде пустых колец). Анизохромия - из­менение интенсивности окраски эритроцитов в патологи­ческих случаях. Встречаются бледно окрашенные эрит­роциты - гипохромия, интенсивно окрашенные - гиперхромия. Эритроциты могут окрашиваться не только кислыми, но и основными красителями - полихромазия.

Обнаруживаются при патологии в периферической кро­ви ядросодержащие эритроциты: нормобласты, эритро­бласты и мегалобласты. Мегалоциты и мегалобласты ха­рактерны для анемии Аддисона-Бирмера.

В эритроцитах можно иногда обнаружить остатки ядерной оболочки - так называемые кольца Кебота и ядерные остат­ки - тельца Жолли при мегалобластных анемиях, отравле­нии гемолитическими ядами и др. При свинцовом отравлении и у людей, принимающих препа­раты крови, наблюдается базофильная пунктуация эритроци­тов (наличие точечной зернисто­сти). Сидероциты - эритроциты с включениями не гемоглобинового железа (ферритин, гемосидерин) в виде мелких гранул синего цвета.

2.5 Подсчет лейкоцитов